DNAren sintesiaren eraginkortasuna zehazten duten faktoreak

ADN, RNA eta azido nukleiko ez-naturalen sintesi tipikoan, Desprotekzio eta Akoplamendu urratsak funtsezko eginkizunak betetzen ditu.

Desprotekzio urratsa euskarri solidoaren DMT taldea edo aurreko nukleosidoaren 5' hidroxilo taldea kentzea da azido organikoarekin, eta hidroxilo taldea agerian utzi zuen hurrengo akoplamendu-urratserako.Diklorometanoan edo toluenoan dagoen % 3ko azido trikloroacetikoa desprotekzio urratsa egiteko erabiltzen da gehienbat.Azido trikloroacetikoaren kontzentrazioa eta desprotekzio denbora (desblokeatzeko denbora) nagusitzen dira azken produktuen purutasunean.Kontzentrazio baxuak eta desblokeatzeko denbora nahikorik ezak DMT taldea erreakzionatu gabe uzten du, eta horrek etekina murrizten du eta nahi ez diren ezpurutasunak areagotzen ditu.Desblokeatzeko denbora luzeak sintetizatutako sekuentzien depurina ekar dezake, ustekabeko ezpurutasunak sortuz.

Akoplamendu urratsa disolbatzaileen ur edukiarekiko eta aireko hezetasunarekiko sentikorra da.Sintesiko uraren kontzentrazioa 40 ppm baino txikiagoa izan behar da, hobeto 25 ppm baino txikiagoa.Sintesi anhidroaren egoera mantentzeko, azido nukleikoen sintesia hezetasun baxuko ingurune batean egin behar da, beraz, gure bezeroari gomendatzen diogu.Amiditak disolbatutako ekipoak, Fosforamidita hautsa edo koipetsua azetonitrilo anhidroan disolba dezakeena airearekin kontaktua saihesteko.

DNA sintesiaren eraginkortasuna zehazten duten faktoreak5
DNAren sintesiaren eraginkortasuna zehazten duten faktoreak4

Fosforamiditak disolbatzea hobea da ur ez-egoeran, eta tranpa molekularrak erreaktiboetan eta amiditatan aztarna ura xurgatzeko, prestatu behar da.Tranpa molekularrak.50-250 ml-ko erreaktibo botiletarako 2 g-ko azpia gomendatzen dugu, 5 g 250-500 ml-ko erreaktibo botiletarako, 10 g 500-1000 ml-ko erreaktibo botiletarako eta 20 g 1000-2000 ml-ko erreaktibo botiletarako.

Fosforamiditak disolbatzea atmosfera geldoan egin behar da, eta aktibatzaileen erreaktiboen eta azetonitriloen ordezkapena garaiz amaitu behar da.Kapadura eta Oxidazio erreaktiboak ahalik eta azkarren erabili behar dira, irekitako erreaktiboek iraupen-bizitza txikiagoa ematen dute eta sintesian jarduera gutxiago ematen dute.


Argitalpenaren ordua: 2022-09-09